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类器官冻存液

  • 货号:LMB-DCY-100
  • 品牌:LMB
  • 规格:100ml
  • 货期:现货
  • 运输条件:2-8℃/-20℃

目录价:¥ 1400.00

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  • 产品描述

产品信息

 

产品组成

规格

储存条件及周期

 

LMB类器官冻存

50ml/100ml

-20储存1

类器官(或细胞)的冻存

  1. 向回收后的类器官(或细胞)中加入预冷的(2-8℃OrganoidCryopreservationMedium类器官冻存液,吹打混匀后迅速转移至细胞冻存管中(冻存管内细胞悬液体积应大于0.5mL)。
    注意:每1mL冻存液推荐冻存1x103-1x107个细胞或对应细胞量的类器官。
  2. 将冻存管放入细胞冻存降温盒内(降温盒须提前平衡至室温或4℃),随后立即将降温盒放入-80℃超低温冰箱中;也可将冻存管进行人工梯度降温处理,如4℃静置10分钟,-20℃保存1小时,-80℃保存过夜。
  3. 次日或12小时后将冻存管于低温条件下(不高于-70℃,推荐使用干冰或原降温盒)转移至液氮中长期保存。

类器官(或细胞)的复苏

  1. 10ml类器官培养缓冲液于15ml离心管中。
  2. 从液氮罐中取出冻存的类器官细胞,快速置于37℃水浴锅中融解。
  3. 水浴融解过程中,需轻轻摇动冷冻管,以确保冻存液在1-2分钟内完全融解。
  4. 将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml离心管,使用移液管轻轻吹打6-8次,300g离心5分钟,然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量类器官缓冲液重悬移入1.5ml离心管300g离心5min。
  5. 基质胶重悬,每孔25μl基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min成胶,添加500μl类器官培养基。
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